水稻GluB-4终止子的克隆与功能分析

编号 zgly0001652789

文献类型 期刊论文

文献题名 水稻GluB-4终止子的克隆与功能分析

作者 李文静  冯雪  孙艳香 

作者单位 廊坊师范学院生命科学学院 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2018年10期

年份 2018 

分类号 Q943.2  S511 

关键词 水稻  GluB-4终止子(GluB-4-T)  胭脂碱合酶终止子(nos-T)  GUS组织化学染色  GUS活性分析 

文摘内容 目前转基因常用的终止子大多为细菌或真菌来源,有可能引起转基因食品安全性问题。本研究以水稻(Oryzasativa)‘kitaake’为材料,克隆了谷蛋白B-4基因(GluB-4)的终止子GluB-4-T(GenBank登记号:X14393),分析了其在不同启动子驱动下替代根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)胭脂碱合酶终止子(nos-T)的可能性。β-d-葡糖醛酸酶(GUS)组织化学染色结果表明, GluB-4-T在GluB-3启动子驱动下,未改变GluB-3启动子的组织表达特异性,但GUS表达强度发生了改变; GUS活性分析显示GluB-4-T GUS活性是nos-T的2.4倍。为验证GluB-4-T增强外源基因表达的特性不依赖于上游启动子序列,将其克隆到强的胚乳特异性启动子GluC和组成型启动子OsActin下, GUS活性分别是nos-T的2.0和2.2倍,说明GluB-4-T增强外源基因表达的特性不依赖于上游启动子序列。以上结果表明GluB-4-T在水稻体内发挥正常的转录终止活性,且比nos-T表达活性强,可以作为有效终止子用于遗传转化,避免多基因转化系统中由于转基因同源性过高引起的转基因沉默现象。该结果为实现外源目的基因在水稻胚乳中特异表达提供理论依据。