猴头菌锰过氧化物酶1基因在构巢曲霉的异源转化与表达

编号 zgly0000817739

文献类型 期刊论文

文献题名 猴头菌锰过氧化物酶1基因在构巢曲霉的异源转化与表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 尹立伟  池玉杰 

作者单位 东北林业大学林学院 

母体文献 林业科学研究 

年卷期 2013(4)

页码 480-487

年份 2013 

分类号 S718.8 

关键词 猴头菌  锰过氧化物酶  构巢曲霉  转化  表达 

文摘内容 为提高猴头菌菌株CB1锰过氧化物酶(MnP)基因的表达产量,采用PEG/CaCl2介导的原生质体转化方法,将携带有He-mnp1的重组质粒pLB01/He-mnp1转入到构巢曲霉尿嘧啶尿苷营养缺陷菌株TN02A7的原生质体中,获得了转化子菌株TN02A7-He-mnp1,并在乙醇脱氢酶启动子alcA(p)控制下实现了异源表达。将TN02A7-He-mnp1、TN02A7、构巢曲霉野生型菌株WJA01、猴头菌菌株CB1在相同的木质素环境下进行培养并检测MnP酶活性,结果表明: 转化子菌株TN02A7-He-mnp1在0.05 g.L-1血红素的情况下、诱导96 h后酶活性最高为38.31 U.L-1,比不添加血红素的酶活力高8.64倍,但比猴头菌菌株CB1的酶活力低,而TN02A7与WJA01始终无MnP酶活性,说明基因He-mnp1已经成功地被转化到TN02A7-He-mnp1中,并在木质素环境下得到表达,血红素是重组MnP基因异源表达的限制性因素之一。本文为生产MnP和提高MnP产量提供了新的途径。