正交设计优化东亚砂藓DDRT-PCR反应体系

编号 zgly0001372972

文献类型 期刊论文

文献题名 正交设计优化东亚砂藓DDRT-PCR反应体系

作者 沙伟  都艳霞  张梅娟 

作者单位 齐齐哈尔大学生命科学与工程学院生物系 

母体文献 武汉植物学研究 

年卷期 2009年02期

年份 2009 

分类号 Q943.2 

关键词 正交设计  东亚砂藓  DDRT-PCR 

文摘内容 利用正交实验设计L25(56)对东亚砂藓(Racomitrium japonicum)DDRT-PCR反应体系的6因素(Mg2+、dNTP、锚定引物、随机引物、模板DNA、Taq酶)在5个水平上进行优化实验。结果筛选出各反应因素的最佳体系(20μL)为:Mg2+2.25mmol/L、dNTP0.4mmol/L、锚定引物1.0μmol/L、随机引物0.7μmol/L、模板DNA1.6μL、Taq酶2.5U。对东亚砂藓DDRT-PCR最佳反应体系进行梯度PCR引物退火温度筛选,得到的最佳退火温度为45.4℃。该优化体系的建立,为进一步进行东亚砂藓抗旱基因的筛选与克隆等一系列分子研究提供了重要参考依据。