香石竹斑驳病毒的鉴定和RT-PCR检测

编号 zgly0001248909

文献类型 期刊论文

文献题名 香石竹斑驳病毒的鉴定和RT-PCR检测

作者 孔宝华  蔡红  刘进元  陈海如  常胜军  李文君  段永嘉 

作者单位 云南农业大学云南省植物病理重点实验室  清华大学生物科学与技术学院  云南农业大学云南省植物病理重点实验室 昆明650201  昆明650201 

母体文献 植物保护 

年卷期 2002年01期

年份 2002 

分类号 S436.8  S432.41 

关键词 香石竹  香石竹斑驳病毒  鉴定  RTPCR检测 

文摘内容 从表现为叶斑驳、花碎色症状的香石竹病株上获得一病毒分离物 ,电镜负染观察到直径为 2 8～ 33nm的球状粒子。病毒提取液经紫外光测定呈典型核蛋白吸收曲线 ,OD2 60 /OD2 80 =1 70 ;血清学反应与CarMV抗血清出现明显的沉淀线。通过以上实验结果 ,确定该病毒分离物为香石竹斑驳病毒 (carnationmottlevirus ,CarMV)。根据该病毒的RNA序列设计引物 ,对病健材料进行了RT PCR检测 ,结果从感病材料中扩增出大约 6 0 0bp的特异片段 ,而健康植物无此扩增带。将PCR产物连接 pGEM-T-easy载体 ,转化大肠杆菌JM 10 9,得到了含目的片段的重组子 ,经双脱氧序列分析 ,与Guilley报道的序列对应部分的核苷酸序列基本一致 (其同源性达 96 % ) ,最低检出病毒核酸含量为 5ng ,表明应用RT PCR检测香石竹斑驳病毒是可行的