造纸废水纸浆沉淀物中未培养微生物纤维素酶基因的克隆和鉴定

编号 zgly0000436209

文献类型 期刊论文

文献题名 造纸废水纸浆沉淀物中未培养微生物纤维素酶基因的克隆和鉴定

作者 许跃强  段承杰  周权能  唐纪良  冯家勋  庞浩  封毅  莫新春  郭鸿  张鹏 

作者单位 广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室  广西大学生命科学与技术学院 

母体文献 微生物学报 

年卷期 2006,46(5)

页码 783-788,i0001

年份 2006 

分类号 Q78 

关键词 纸浆沉淀物  细菌多样性  未培养微生物  宏基因组文库  纤维素酶 

文摘内容 提取纯化造纸废水纸浆沉淀物的宏基因组DNA并构建16S rDNA文库, 系统发育分析显示该环境中存在大量的未培养细菌且具有种类的多样性。以柯斯质粒为载体构建了1个含10000个克隆的宏基因组文库, 文库容量为3.53×10^8bp。筛选文库得到2个表达内切葡聚糖酶活性的克隆、3个表达外切葡聚糖酶活性的克隆和2个表达阻葡萄糖苷酶活性的克隆。从表达不同活性的克隆中分别挑选活性最强的进行鉴定, 得到3个新的纤维素酶基因umcel5L、umcel5M和umbgl3D。umcel5L、umcel5M和umbgl3D分别编码产生内切葡聚糖酶、纤维糊精酶和阻葡萄糖苷酶, 其编码产物与已报道的纤维素酶一致性最高的分别为43%、48%和46%。这是第一次采用未培养方法对造纸废水纸浆沉淀物中的细菌多样性进行分析并从中克隆纤维素酶基因的报道。