角蛋白19片段单克隆抗体的制备及鉴定

编号 zgly0001469468

文献类型 期刊论文

文献题名 角蛋白19片段单克隆抗体的制备及鉴定

作者 张慧茹  翟晋豫  刘珍  王雪琴  孟素香 

作者单位 河南工业大学生物工程学院  河南省生物工程技术研究中心 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2014年12期

年份 2014 

分类号 Q78 

关键词 角蛋白19片段(CYFRA21-1)  单克隆抗体  IgG  鉴定 

文摘内容 为制备角蛋白19片段(CYFRA21-1)的单克隆抗体(mAb),采用间接ELISA方法检测免疫小鼠的抗体效价,融合、筛选、克隆化单克隆抗体,将筛选得到的单克隆细胞株注入小鼠腹腔制备腹水,采用辛酸硫酸铵法、蛋白A柱纯化腹水抗体,以SDS-PAGE凝胶电泳、紫外分光光度法检测抗体纯度和浓度;利用鼠抗体亚型鉴定试剂盒对单克隆抗体进行亚型鉴定;采用阻断ELISA法测定mAb的敏感性(IC50)。结果表明,筛选获得4株分泌角蛋白19片段mAb的细胞株,将4株细胞株2F9、3H5、7C3、6F11注入小鼠腹腔,分别获得效价为2.56×105、5.12×105、5.12×105、2.56×105的单克隆抗体,经纯化,抗体蛋白浓度为12.43mg/mL~16.00mg/mL,为IgG1型抗体,其IC50在1.03ng/mL~1.53ng/mL之间。说明获得了4株分泌高效价CYFRA21-1单克隆抗体的细胞株,为建立CYFRA21-1的检测试剂盒奠定了基础。