家蚕miR-0047对丝胶蛋白基因BmSer-1表达的调控作用研究

编号 zgly0001563543

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕miR-0047对丝胶蛋白基因BmSer-1表达的调控作用研究

作者 钱平  蒋涛  何平  陈晨  唐旭东  唐顺明  沈兴家 

作者单位 江苏科技大学生物技术学院江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室  中国农业科学院蚕业研究所农业部蚕桑遗传改良重点开放实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2017年06期

年份 2017 

分类号 S881.26 

关键词 家蚕  微小RNA  Bmo-miR-0047  丝胶蛋白基因Ser-1  转录后调控 

文摘内容 对家蚕中部丝腺小RNA高通量测序获得若干新miRNA,生物信息学分析发现Bmo-miR-0047可能对家蚕丝胶蛋白基因Bm Ser-1有调控作用。设计特异性茎环引物,利用半定量RT-PCR检测分析家蚕5龄3 d幼虫丝腺(包括前、中、后部丝腺)、头部、脂肪体、表皮、中肠、马氏管、精巢/卵巢、血淋巴细胞和气管等12个器官组织中Bmo-miR-0047的表达情况。结果显示,中部丝腺中Bmo-miR-0047的相对表达量明显高于其他组织,说明在家蚕5龄幼虫期Bmo-miR-0047对Bm Ser-1基因的表达调控存在时空特异性。为了进一步分析Bmo-miR-0047对Bm Ser-1基因表达的调控作用,构建重组表达载体pc DNA3.0(ie1-egfp-pri-miR-0047-SV40)和p GL3(A3-luc-Bm Ser-1 3’UTR-SV40),并以海肾荧光素酶报告质粒pRL-CMV为内参,利用家蚕卵巢培养细胞Bm N进行共转染。转染后检测发现实验组Bm N细胞中的荧光素酶活性与对照组相比显著减弱,表明Bmo-miR-0047在体外培养细胞中对Bm Ser-1基因的表达具有负调控作用。