红毛丹SRAP反应体系优化及多态性标记筛选

编号 zgly0001496106

文献类型 期刊论文

文献题名 红毛丹SRAP反应体系优化及多态性标记筛选

作者 林兴娥  周兆禧  葛宇  臧小平  肖正新  尹俊梅  马蔚红 

作者单位 中国热带农业科学院海口实验站  保亭黎族苗族自治县国营农场管理局  中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2015年11期

年份 2015 

分类号 S667.9 

关键词 红毛丹  SRAP  PCR 

文摘内容 为建立成熟可靠的红毛丹SRAP-PCR扩增检测技术体系,本研究首先采用单因素实验设计,对反应体系中的DNA模板、Mg2+、d NTPs、Taq DNA聚合酶和引物浓度等5个主要影响因素,设置不同的水平梯度,筛选出适宜的因子范围;在此基础上,进一步采用L16(45)正交设计,建立了红毛丹SRAP-PCR最佳反应体系:20μL体系中包含DNA模板20 ng、d NTPs 0.25 mmol/L、引物0.6μmol/L、r Taq酶1.0 U、Mg2+2.5 mmol/L。并利用优化的反应体系,从116对SRAP引物组合中筛选出37对扩增条带清晰、产物多态性较好的引物。本研究建立的SRAP-PCR体系及筛选的引物,将为红毛丹从分子水平进行种质资源遗传多样性分析、品种指纹图谱构建等研究提供基础。