鲢IGFBP-1基因全长cDNA的克隆及表达分析

编号 zgly0000823806

文献类型 期刊论文

文献题名 鲢IGFBP-1基因全长cDNA的克隆及表达分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 丁为群  梁宏伟  邹桂伟  王晓阳  曹磊  刘迪秋  李忠 

作者单位 昆明理工大学生命科学与技术学院  中国水产科学研究院长江水产研究所 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2013(5)

页码 1-8

年份 2013 

分类号 S965.113.6 Q786 

关键词 白鲢  低氧  IGFBP-1  RACE  Real-time  PCR 

文摘内容 【目的】:克隆鲢胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)基因,分析其编码蛋白的结构与功能,并分析低氧胁迫下该基因在鲢肝脏中的表达情况。【方法】:采用cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNAends,RACE)扩增鲢IGFBP-1基因的全长cDNA,通过半定量RT-PCR法对鲢肌肉、心脏、脑、肾脏、肝脏、腮和脾等组织器官IGFBP-1mRNA的表达水平进行检测,利用Real-time PCR法检测急性低氧胁迫0,2,4,6,8,10和12h后鲢肝脏组织中IGFBP-1表达量的变化。【结果】:鲢IGFBP-1全长cDNA为1 081bp,具有73bp的5′非编码区(Un-translated Regions,UTR)、789bp的开放读码框(Open reading frame,ORF),以及219bp的3′UTR,编码含262个氨基酸的蛋白质。RT-PCR结果表明,IGFBP-1在肌肉、心脏、脑、肾脏、肝脏、腮和脾等7种组织中均有表达,其中在肝脏中的表达量最高,心脏和肌肉次之,在脑中的表达量最低;Real-time PCR结果表明,在低氧胁迫6h时,IGFBP-1cDNA在肝脏中的表达量显著增高,随后略有降低但仍显著高于未进行低氧胁迫处理组。【结论】:克隆得到鲢IG-FBP-1全长cDNA,该基因在肝脏组织中大量表达;随着低氧胁迫时间的延长,鲢肝脏中IGFBP-1mRNA表达量升高,达最大值后继续低氧胁迫其表达量略有降低。