日本血吸虫热休克蛋白70在昆虫细胞Sf9中的表达鉴定

编号 zgly0001449207

文献类型 期刊论文

文献题名 日本血吸虫热休克蛋白70在昆虫细胞Sf9中的表达鉴定

作者 徐瑞敏  李运燕  段明明  刘群  苑纯秀  杨健美  冯新港 

作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室  上海师范大学生命与环境科学学院 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2013年03期

年份 2013 

分类号 S852.7 

关键词 日本血吸虫  热休克蛋白70  杆状病毒/昆虫表达系统  表达  免疫原性 

文摘内容 本研究旨在用杆状病毒/昆虫细胞表达系统表达日本血吸虫热休克70蛋白(SjHSP70),获得重组的rSjHSP70蛋白。利用PCR技术从日本血吸虫cDNA文库中克隆SjHSP70全长序列;亚克隆到pFastBacHTA中,构建重组杆状病毒转移载体pFastBacHTA-SjHSP70,导入DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒reBacmid-SjHSP70,再转染到Sf9昆虫细胞制备重组病毒;将重组病毒感染细胞,用间接免疫荧光技术鉴定重组蛋白的表达;His柱亲和层析法纯化目的蛋白;Western blot技术对纯化蛋白进行抗原性鉴定。SjHSP70基因全长序列1962 bp,在Sf9昆虫细胞中获得高效表达;His柱亲和层析法纯化表达的蛋白可被日本血吸虫感染小鼠的阳性血清识别。用杆状病毒昆虫细胞表达系统成功表达了SjHSP70,为深入研究SjHSP70分子的免疫生物学功能提供了材料。