油茶3羟酰CoA脱水酶基因的克隆与表达分析

编号 zgly0001479467

文献类型 期刊论文

文献题名 油茶3羟酰CoA脱水酶基因的克隆与表达分析

作者 王建勇  谭晓风  曾艳玲  龙洪旭  陈鸿鹏  刘凯 

作者单位 中南林业科技大学  经济林培育与保护教育部重点实验室  经济林育种与栽培国家林业局重点实验室  国家林业局桉树研究开发中心  广西林业科学研究院 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2014年10期

年份 2014 

分类号 Q943.2 

关键词 油茶  3羟酰CoA脱水酶  克隆  表达分析 

文摘内容 3羟酰CoA脱水酶是一类催化3羟酰CoA脱水转化成为烯酰CoA形式的酶。本研究以国审油茶品种‘华硕’种子为材料,在已构建的转录组和表达谱数据库的基础之上,采用RACE技术,克隆到一个油茶3羟酰CoA脱水酶基因的cDNA全长,命名为CoHCD(Gen Bank登录号KJ910336)。该基因cDNA全长为1145bp,含有666bp的开放读码框,编码221个氨基酸,分子量为25.2kDa,理论等电点p I为9.4,疏水残基占整个氨基酸残基的48.9%,是亲水性蛋白,具有4个比较明显的跨膜区和蛋白质酪氨酸磷酸酶基序HGXXGXXRS。在基因c DNA全长序列的基础上,分别成功地构建了原核表达载体、超表达载体和RNA干扰载体,其中,原核表达载体在宿主细胞BL21(DE3)上成功诱导表达,获得表观分子量约为25 k Da的相应目的蛋白。实时荧光定量PCR分析表明,在5个不同发育时期的油茶种子中CoHCD高效表达主要集中在8~10月,转录最高峰发生在9月,其表达量在种子发育过程中呈增加趋势。