华南象草原生质体分离及基因瞬时表达研究

编号 zgly0001487357

文献类型 期刊论文

文献题名 华南象草原生质体分离及基因瞬时表达研究

作者 唐然  彭小群  解新明 

作者单位 华南农业大学农学院 

母体文献 草地学报 

年卷期 2015年03期

年份 2015 

分类号 Q943.2  S543.9 

关键词 象草  原生质体  PEG介导  瞬时表达 

文摘内容 以华南象草（Pennisetum purpureum）幼叶鞘为材料,采用L16（45）正交试验设计,对分离原生质体过程中的纤维素酶浓度、离析酶浓度、酶解液pH、甘露醇浓度、酶解时间5个因素进行筛选,建立了高效的象草叶鞘原生质体分离体系,并进行目标基因的瞬时转化,以期为象草基因功能研究奠定基础。结果表明:叶鞘在含有1.5%纤维素酶R-10,0.75%离析酶R-10,0.5 mol·L-1甘露醇,pH为5.8的酶解液中酶解4 h,原生质体产量达5.11×106个·g FW-1,活力达91.08%,酶解时间对象草原生质体产量和活力的影响最大。用PEG介导法将2个分别带有绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的载体转入原生质体中,转化效率最高可达77.47%,共转化效率为8.79%。所分离的原生质体可用于基因的瞬时表达研究。