发情期家兔输卵管上皮细胞和基质细胞的分离培养与鉴定

编号 zgly0000556711

文献类型 期刊论文

文献题名 发情期家兔输卵管上皮细胞和基质细胞的分离培养与鉴定

作者 赵永贞  陈秀荔  张彦明  曹斌云  马云  王利心 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  西北农林科技大学动物医学院 

母体文献 西北农林科技大学学报 

年卷期 2008,36(2)

页码 27-33

年份 2008 

分类号 Q954.633.2 

关键词 输卵管  上皮细胞  基质细胞  共培养  免疫组化和免疫荧光  家兔 

文摘内容 【目的】探讨输卵管上皮细胞和基质细胞的体外分离培养方法及在激素刺激下基质细胞对上皮细胞的作用。【方法】通过差速贴壁法体外分离纯化兔输卵管上皮细胞和基质细胞；免疫组织化学染色和免疫荧光染色方法鉴定上皮细胞和基质细胞的类型和纯度；并在无胎牛血清的DMEM／F12培养液和含体积分数15％胎牛血清的DMEM／F12培养液中，分别添加不同浓度的雌激素(17β-E2)和孕激素(P4)，比较上皮细胞和基质细胞的增殖情况及其对上皮细胞／基质细胞共培养的影响。【结果】体外成功地分离到兔输卵管上皮细胞和基质细胞；兔输卵管上皮细胞经鼠抗人细胞角蛋白单克降抗体(anti-CK18)免疫组织化学染色后呈阳性，细胞质呈棕色，免疫荧光染色检测其纯度在98％以上；兔输卵管基质细胞经鼠抗人波形蛋白单克降抗体(anti—Vimentin)免疫组织化学染色后呈阳性，细胞质呈棕色，免疫荧光染色检测其纯度在95％以上。17β-E2和P4均能促进兔输卵管上皮细胞和基质细胞的增殖，使其数量明显增加。基质细胞与上皮细胞共培养，上皮细胞增殖较快。【结论】差速贴壁法能够获得纯度较高的输卵管上皮细胞和基质细胞，在17β-E2和P4共同作用下，少量基质细胞能促进上皮细胞生长。