农杆菌介导的栓皮栎体胚遗传转化初步研究

编号 zgly0001738050

文献类型 期刊论文

文献题名 农杆菌介导的栓皮栎体胚遗传转化初步研究

作者 罗珍珍  张存旭  朱景乐  王敏  张艳婷 

作者单位 西北农林科技大学林学院  国家林业和草原局泡桐研究开发中心 

母体文献 西南林业大学学报:自然科学 

年卷期 2021,41(5)

页码 58-63

年份 2021 

分类号 S792.18 

关键词 栓皮栎  树木  遗传转化  体细胞  胚胎发生  GUS基因 

文摘内容 为了建立栓皮栎体胚遗传转化体系,以未成熟合子胚诱导的体胚为转化受体,采用带有pCAMBIA1301质粒的根癌农杆菌菌株EHA105,其中含有hptⅡ和GUS基因,研究不同因子对遗传转化的影响。结果表明:选择培养中适宜的抗生素浓度为300 mg/L头孢霉素和30 mg/L潮霉素。预培养时间为15 d时,转化率达91.7%;菌液浓度为OD600=0.5,乙酰丁香酮浓度为200μmol/L时,转化率可达100%。在添加潮霉素的选择培养基中培养4周后,组织化学染色和PCR检测证实,GUS报告基因已经转入到体胚中并正常表达。