家蚕几丁质脱乙酰基酶BmCDA7的纯化与生化性质

编号 zgly0001693561

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕几丁质脱乙酰基酶BmCDA7的纯化与生化性质

作者 郭兴明  刘霖  杨君  杨青 

作者单位 大连理工大学生物工程学院 

母体文献 中国生物防治学报 

年卷期 2020年01期

年份 2020 

分类号 S476 

关键词 鳞翅目昆虫  围食膜  几丁质脱乙酰基酶  害虫防治 

文摘内容 几丁质脱乙酰基酶是几丁质修饰关键酶,在昆虫几丁质组装过程中发挥重要作用,是潜在的绿色农药靶标。课题组近期研究发现家蚕中肠3个几丁质脱乙酰基酶中,BmCDA7对围食膜几丁质具有最高活性,在进食期高表达,可能参与该时期围食膜形成。本研究通过进一步优化分离纯化条件,建立了金属螯合层析和阴离子交换层析两步分离纯化方法,获得了高纯度的BmCDA7重组蛋白。采用SDS-PAGE结合Calcofluor White M2R显色定性确定了BmCDA7对底物乙二醇几丁质的催化活性。通过测定催化反应过程中释放的乙酸量,确定了BmCDA7的最适反应条件、稳定性及底物选择性。BmCDA7催化反应最适温度为60℃,最适pH为8.0,在温度低于60℃以及中性、偏碱性条件下较为稳定。此外,BmCDA7对乙二醇几丁质、胶体几丁质的酶活力分别为2.9926和0.4270μmol/(min·μmol),而对高结晶度的α-几丁质和β-几丁质无活力。这些结果丰富了昆虫几丁质脱乙酰基酶的生物化学基础研究。