稻瘟病菌附着胞差异表达基因文库的构建方法

编号 zgly0001311992

文献类型 期刊论文

文献题名 稻瘟病菌附着胞差异表达基因文库的构建方法

作者 刘同宝  卢建平  林福呈 

作者单位 浙江大学生命科学学院  浙江大学生物技术研究所 杭州310029  杭州310029 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2006年02期

年份 2006 

分类号 S435.111.4 

关键词 稻瘟病菌  附着胞  抑制性差减杂交 

文摘内容 利用抑制性差减杂交方法构建了稻瘟病菌分生孢子接种24 h所形成的附着胞差异表达基因文库。采用复印胶片诱导稻瘟病菌附着胞形成,在孢子浓度为1.0×106个/mL时,附着胞的形成率达到96.5%。分别提取附着胞、菌丝和分生孢子RNA,反转录成cDNA并经A luⅠ酶切、接头连接后,以附着胞cDNA片段为tester,菌丝及分生孢子cDNA为driver进行抑制性差减杂交,构建成差减文库。从文库中分离获得142个基因片段,通过RT-PCR方法鉴定其中的71个为差异表达基因,证实文库高效可靠。构建优质的稻瘟病菌附着胞差异表达基因差减文库,为深入了解附着胞形成过程中基因的表达及功能奠定了基础。