小鼠输卵管上皮细胞的原代培养及纯化方法研究

编号 zgly0001371126

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠输卵管上皮细胞的原代培养及纯化方法研究

作者 赵晓娥  兰杰  王妍  杨培先  胡林勇  马保华 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2009年02期

年份 2009 

分类号 Q813 

关键词 输卵管上皮细胞  细胞培养  细胞纯化  小鼠 

文摘内容 建立小鼠输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法。小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用组织块培养法和酶消化法。酶消化法于37℃分为4个处理组进行。处理1以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA消化5、102、0 min;处理2以0.5 g/L胰酶+0.08 g/L EDTA消化35、507、5 min;处理3以0.3 g/L的Ⅰ型胶原酶消化60、902、40 min;处理4以2.5 g/L胰酶+0.4 g/L EDTA和0.3 g/LⅠ型胶原酶(1∶2)消化60 min,150 min。原代细胞纯化采用差速贴壁和反复差速贴壁法。传代采用胰酶两步消化法进一步纯化输卵管上皮细胞。组织块法原代培养成纤维细胞生长优势明显,传代纯化细胞效果不佳。用酶消化法原代培养时,处理1效果不理想;处理2采用3个消化时间时均取得比较理想的结果;处理3消化240 min时结果较好;处理4消化150 min效果较好。原代细胞纯化,反复差速贴壁得到的上皮细胞较纯,进一步传代纯化细胞取得了理想的结果。小鼠输卵管上皮细胞原代培养采用酶消化法结合反复差速贴壁分离纯化细胞,传代采用两步消化法,可以成功地进行小鼠输卵管上皮细胞的分离纯化培养。