苏云金芽孢杆菌cry基因芯片检测方法的研究

编号 zgly0000336127

文献类型 期刊论文

文献题名 苏云金芽孢杆菌cry基因芯片检测方法的研究

作者 刘旭光  宋福平  文思远  王升启  黄大昉  张杰 

作者单位 中国农业科学院植物保护研究所/植物病虫害生物学国家重点实验室 

母体文献 中国农业科学 

年卷期 2004,37(7)

页码 987-992

年份 2004 

分类号 S482.39 

关键词 苏云金芽孢杆菌  cry基因  基因芯片  检测方法  杀虫晶体蛋白  生物防治 

文摘内容 建立了一种不经PCR扩增而直接应用寡核苷酸芯片从苏云金芽孢杆菌总DNA中检测cry基因的方法。对探针长度、浓度、总DNA含量、标记方法以及灵敏度等条件进行了研究。结果表明, 用高浓度Klenow酶随机标记高浓度的总DNA与寡核苷酸探针(40～50mer、40μmol·L^-1)杂交可用于检测Bt菌株中含有的cry基因; 不同长度探针之间对杂交信号的影响存在显著性差异(P<0.01), 而不同浓度的探针之间没有显著性差异。此方法的其它条件为杂交温度42℃、时间3h; 检测的样品总DNA的灵敏度约为2.5μg; 标记产物杂交用量(0.625-20μg)的对数值与信号值的对数值之间存在明显的线性关系(r^2=0.985～0.989)。