一种快速提取血吸虫虫卵方法的建立

编号 zgly0001478287

文献类型 期刊论文

文献题名 一种快速提取血吸虫虫卵方法的建立

作者 赵登云  许瑞  林矫矫  陆珂  洪炀  李浩  童来保  赵家喜  朱传刚 

作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室  江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心  安徽省望江县畜牧兽医局 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2014年06期

年份 2014 

分类号 S852.735 

关键词 日本血吸虫  虫卵  氢氧化钠  抗原 

文摘内容 为探索一种快速提取血吸虫虫卵并保持虫卵抗原性的方法,本研究用血吸虫尾蚴感染兔并收集其肝脏,分别用不同浓度的Na OH、不同温度和时间消蚀含有虫卵的肝脏匀浆液,以确定最佳提取虫卵条件。通过方阵法确定所提取虫卵的可溶性抗原最佳包被浓度,并对虫卵抗原灵敏度进行了检测。另外,通过测定75份阳性血吸虫水牛血清和60份阴性水牛血清,进一步检测了此法提取并制备抗原的灵敏性。结果表明,本研究所建立的方法在不同Na OH浓度、作用温度和作用时间下,对提取的虫卵均产生影响。Na OH浓度越高,作用时间越久,消蚀温度越高,对虫卵的破坏越显著,表现在虫卵内容物的凝聚和消融,虫卵的空壳化增多。3种不同浓度Na OH提取虫卵的抗原检测下限分别为1/800、1/1600、1/3200,较过筛法的抗原检测下限1/400有显著提高。对水牛的血清检测结果表明,用Na OH消蚀法提取的虫卵抗原检测血吸虫灵敏性是93%,比常规过筛法高5%,特异性是100%,比常规过筛法高3%。本研究结果表明Na OH消蚀法可快速提取高洁净度的虫卵并保持虫卵的抗原性不被破坏,该法提取虫卵的最佳Na OH浓度是5%~10%,作用温度是45℃左右,作用时间是5~10 min。在最佳条件下制备的虫卵较常规过筛法的纯净度高,虫卵得率也是常规过筛法的3倍以上。