柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系的建立与优化

编号 zgly0000601133

文献类型 期刊论文

文献题名 柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系的建立与优化

作者 吴鑫  雷天刚  何永睿  刘小丰  许兰珍  彭爱红  陈善春 

作者单位 西南大学园艺园林学院  西南大学柑桔研究所  国家柑桔品种改良中心 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2008,6(1)

页码 170-176

年份 2008 

分类号 S566.902  S511 

关键词 柑桔  SRAP  ISSR  建立  优化 

文摘内容 通过对PCR反应程序、反应体系(DNA模板量、PCR反应体积、Mg^2＋浓度、dNTP浓度、Taq酶用量、引物量)、电泳检测方法的系统优化，建立了柑桔SRAP—PCR和ISSR-PCR体系；以此进行大规模引物筛选，从而建立了柑桔SRAP和ISSR分子标记技术体系。SRAP—PCR：25μL体系，模板DNA25ng，Tris—HCl 10mmol／L，KCl 50mmol／L，Mg^2＋ 1．2mmol／L，dNTP120μmol／L，Taq酶1．5U，引物0．4μmol／L，反应程序为94℃预变性5min，35个循环(94℃ 30s，47℃ 1min，72℃ 1min)，72℃延伸10min；ISSR—PCR：25μL体系，模板DNA 25ng，Tris—HCl 10mmol／L，KCl 50mmol／L，Mg^2＋ 1．6mmol／L，dNTP200μmol／L，Taq酶1U，引物0．8μmol／L。筛选出稳定性好、多态性高的24对SRAP引物和13条ISSR引物。