桃SSR-PCR主要因子对扩增产物的影响

编号 zgly0000460019

文献类型 期刊论文

文献题名 桃SSR-PCR主要因子对扩增产物的影响

作者 沈志军  马瑞娟  俞明亮  许建兰 

作者单位 江苏省农业科学院园艺研究所 

母体文献 江苏农业学报 

年卷期 2006,22(1)

页码 76-80

年份 2006 

分类号 S662.1 

关键词 桃  简单序列重复  PCR扩增  扩增产物 

文摘内容 以寿星桃为试材, 通过Mg^2+和DNA聚合酶、模板DNA和引物用量的两个双因素试验, 以及dNTP用量的单因素试验, 研究了5个主要因子对SSR扩增结果的影响, 并对桃SSR反应体系进行了优化。结果表明, Mg^2+和DNA聚合酶的用量对SSR扩增结果起着关键作用, 且两者之间存在明显的可作效应; dNTP用量也对SSR的扩增结果起着重要作用, 当浓度在200～300μmol/L时效果较好; 模板DNA与引物用量之阃没有很明显的互作效应, 适当增加引物用量可以提高SSR的正确扩增; 优化的桃SSR反应体系为: 25μl的总反应体积中含1×PCR Buffe、Mg^2+ 3mmol/L、DNA聚合酶1.5U、SSR引物各0.4μmol/L、模板DNA 50ng、dNTP 200 μmol/L。