家蚕转基因技术中若干因素对转基因效率的影响

编号 zgly0001360669

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕转基因技术中若干因素对转基因效率的影响

作者 马三垣  徐汉福  段建平  赵爱春  张美蓉  夏庆友 

作者单位 西南大学蚕学与系统生物学研究所农业部蚕学重点开放实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2009年06期

年份 2009 

分类号 Q96  Q78 

关键词 家蚕  piggyBac  转基因技术  孵化率  转化率  蚕品种  供体质粒  辅助质粒  显微注射  荧光筛选  荧光标记 

文摘内容 建立高效、稳定的家蚕Bombyx mori转基因技术对于推进家蚕功能基因组研究,解决蚕丝产业重大问题以及向非绢丝产业拓展等具有重要意义。本文在已建立的基于piggyBac的家蚕转基因技术基础上,探索了多个影响转基因效率的因素。结果显示:以家蚕品种大造(P50)为供试材料、pBac[GOI]为供体质粒、pHA4PIG为辅助质粒,以眼睛和神经组织特异启动子3×p3启动的红色荧光蛋白基因DsRed为报告基因,在蚕卵产下后2～3h进行注射,综合效果最佳,孵化率和转化率分别达到62.7%和34.8%;荧光筛选的最佳时期在胚胎发育第5到第8天;在2000～8000bp之间时,外源片段的长度对转化率并无太大影响。本研究建立的技术体系,有望为家蚕功能基因研究、品种分子改良和家蚕生物反应器的开发奠定基础,并为其他鳞翅目昆虫转基因技术的建立提供参考。