N端延长对大肠杆菌铁蛋白结构稳定性及其自组装的影响

编号 zgly0001568774

文献类型 期刊论文

文献题名 N端延长对大肠杆菌铁蛋白结构稳定性及其自组装的影响

作者 张瑜  刘中车  王丽君  李迅  王飞 

作者单位 南京林业大学化学工程学院江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室 

母体文献 南京林业大学学报(自然科学版 

年卷期 2017年01期

年份 2017 

分类号 Q936 

关键词 细菌铁蛋白  纳米壳  蛋白质自组装  热力学稳定性 

文摘内容 【目的】研究延长的N端肽链对铁蛋白结构稳定性及蛋白自组装的影响,为在N端融合生物分子构建功能性纳米材料奠定基础。【方法】在大肠杆菌铁蛋白N端添加6个组氨酸残基,所得重组蛋白采用体积排阻色谱、非变性凝胶电泳和圆二色谱等手段与野生型铁蛋白的聚合态、二级结构及热力学稳定性进行对比分析。【结果】体积排阻色谱表明野生型铁蛋白在溶液中以24聚体和二聚体混合物形式存在,但突变蛋白仅以二聚体的形式存在;非变性凝胶电泳实验结果与体积排阻色谱结果吻合,即突变蛋白仅显示1条带,且与野生型铁蛋白的2聚体迁移位置基本相同;圆二色谱结果表明突变蛋白的二级结构与野生型类似,呈典型的α-螺旋结构,突变蛋白的Tm值比野生型降低了1.1℃。【结论】在大肠杆菌铁蛋白亚基的N端增加6个组氨酸残基所得突变蛋白的二级结构没有发生明显变化,但却无法形成24聚体壳状结构,在溶液中仅以二聚体的形式存在,且热力学稳定性有所降低。N端的延长可能导致铁蛋白单体构型发生改变,因而无法进一步组装成壳状结构。