转基因作物中2种除草剂抗性基因aad1和dmo的PCR检测方法

编号 zgly0001466642

文献类型 期刊论文

文献题名 转基因作物中2种除草剂抗性基因aad1和dmo的PCR检测方法

作者 龙丽坤  韩月  杨丹丹  闫伟  李飞武 

作者单位 吉林省农业科学院农业生物技术研究所  哈尔滨师范大学生命科学与技术学院 

母体文献 生物安全学报 

年卷期 2014年04期

年份 2014 

分类号 S188 

关键词 转基因生物  除草剂抗性基因  分子检测  PCR方法 

文摘内容 【背景】抗除草剂转基因作物是全球种植面积最大的一类转基因植物,以除草剂抗性基因作为检测靶标的分子鉴定方法的研究与应用,对转基因生物安全的检测与监测有重要意义。【方法】根据除草剂抗性基因aad1和dmo的核苷酸序列设计PCR检测引物,并进行PCR反应体系优化、方法特异性、灵敏度、再现性等方面的测试,分别建立aad1基因和dmo基因的特异性PCR检测方法。【结果】建立的PCR检测方法在56~64℃的退火温度范围内均能获得一致性结果,具有良好的稳健性。该方法可将含有aad1基因和dmo基因的转基因作物与其他转基因作物区分开,其灵敏度可分别达到20个拷贝和40个拷贝。通过将aad1基因和dmo基因的检测引物放入同一管PCR反应体系中,还能在一次PCR中同时检测这2个靶标基因,双重PCR的检测灵敏度与单一PCR一致。【结论与意义】建立的分子方法可精准检测出含有aad1基因和dmo基因的转基因作物,具有特异性强、灵敏度高的特点,为抗除草剂转基因作物的筛选检测提供了可靠的技术支撑。