柞蚕抗菌肽D基因转化桉树培育抗青枯病株系的研究

编号 zgly0000277157

文献类型 期刊论文

文献题名 柞蚕抗菌肽D基因转化桉树培育抗青枯病株系的研究

学科分类 220.99;林学其他学科

作者 邵志芳  陈伟元 

作者单位 深圳市莲花山公园上 

母体文献 林业科学 

年卷期 2002,38(2)

页码 92-97,T002

年份 2002 

分类号 S792.39 

关键词 柞蚕抗菌肽D  基因转化桉树  培育  青枯病  抗病株系 

文摘内容 通过二次正交旋转组合设计对尾叶桉叶盘愈伤组织分化培养基优化, 获得尾叶桉(Eucalyptus urophylia)叶盘外植体的再生植株。将携带外源目的基因的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)与尾叶桉U6无性系叶盘共培养, 经愈伤组织诱导, 卡那霉素筛选的植株再生, 获得20个小芽, 再将小芽转入附加卡那霉素(Kam)400μg·mL^-1的E3-B培养基中诱根, 获得8株存活且可再生的转化子。取转化苗叶片作胭脂碱合成酶活性检测电泳后呈阳性; 分别以γ-^32p-dCTP及地高辛标记柞蚕抗菌肽D基因作探针, 与转化苗DNA作点杂交及Southern印迹杂交检测, 结果均呈阳性。以上结果表明, 柞蚕抗菌肽D基因已整合到尾叶桉基因组中。将从桉树青枯病重病区分离的强毒青枯菌(Pseudomonas spp.)株(991016)以1×10^9cfu·mL^-1浓度接种转化试管苗, 以未经转基因的尾叶按U6无性系试管苗为对照。结果表明转化苗接种死亡率56.7%, 对照死亡率为86.7%, 由此可推出导入柞蚕抗功肽D基因的尾叶桉转化苗明显提高了对青枯菌的抗性。