毛竹大片段双元细菌人工染色体基因组文库的构建

编号 zgly0000769444

文献类型 期刊论文

文献题名 毛竹大片段双元细菌人工染色体基因组文库的构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 管雨  杨洋  张智俊  罗淑萍  汤定钦 

作者单位 浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地  新疆农业大学农学院 

母体文献 浙江农林大学学报 

年卷期 2011,28(4)

页码 527-532

年份 2011 

分类号 S718.43 

关键词 分子生物学  毛竹  双元细菌人工染色体  基因组文库 

文摘内容 从毛竹Phyllostachys pubescens幼嫩叶片中提取纯化得到高质量的基因组DNA,经限制性内切酶BamH I对它们进行梯度酶切,脉冲场电泳选择合适酶切DNA片段,与脱磷酸化处理过的质粒载体pCLD04541按质量比3∶1相互连接,转化大肠杆菌Escherichia coli DH10B感受态细胞进行蓝白斑筛选,挑取白色克隆,获得重组率较高的阳性克隆,构建了含有104个克隆的双元细菌人工染色体(BIBAC)基因组文库,并通过脉冲场电泳检测分析后确定,所构建的毛竹BIBAC文库平均插入片段为105 kb,约覆盖5倍毛竹基因组。该文库的构建为毛竹基因组研究做好了前期的基础工作。