抗鸭副粘病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定

编号 zgly0001412419

文献类型 期刊论文

文献题名 抗鸭副粘病毒单克隆抗体的制备及其特性鉴定

作者 程晓霞  朱小丽  陈少莺  王劭  陈仕龙  林锋强  李兆龙 

作者单位 福建省农业科学院畜牧兽医研究所  福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2011年02期

年份 2011 

分类号 S858.32 

关键词 鸭源副粘病毒  单克隆抗体  ELISA  IFA  HI 

文摘内容 【目的】制备抗鸭副粘病毒(DPMV)的单克隆抗体,为鸭副粘病毒病免疫学诊断方法的建立奠定基础。【方法】采用差速和蔗糖不连续密度梯度离心法提纯DPMV,免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与骨髓瘤细胞株SP2/0融合,采用间接ELISA、间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制(HI)试验等方法筛选阳性杂交瘤细胞株,并测定其生物学特性。【结果】筛选到7株能稳定分泌抗DPMV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为J28、F4、B3、E39、E41、A12和A30。这7株单克隆抗体都具有ELISA和1FA特性,其中J28和F4还具有HI和中和特性。免疫球蛋白亚类测定结果显示,J28和F4均为IgG1,其他5株均为IgM。相加ELISA试验结果显示,单抗B3,J28与F4,A30与E39/E41/A12分别识别3个不同的抗原位点。特异性测定结果显示,7株单克隆抗体与雏番鸭细小病毒(MPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、番鸭呼肠孤病毒(MDRV)及正常细胞均无交叉反应。【结论】筛选出了7株具有ELISA、1FA等特性且分泌抗DPMV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并明确了各株单克隆抗体的特性,为鸭副粘病毒病的免疫治疗和临床诊断奠定了基础。