编号 zgly0001241849
文献类型 期刊论文
文献题名 高温下线粒体小分子热激蛋白对柠檬酸合成酶、线粒体和花粉粒的保护作用
作者单位 山东师范大学生物系 日本国际农业科学研究中心 济南250014
母体文献 植物生理学报
年卷期 2001年05期
年份 2001
分类号 Q946.1
关键词 线粒体 小分子热激蛋白 柠檬酸合成酶 氧化磷酸化 花粉粒萌发 耐热
文摘内容 选用 pGEX 6P 1表达载体 ,构建GST与线粒体小分子热激蛋白的融合蛋白表达载体 ,使用谷胱苷肽Sepharose 4B亲合柱 ,纯化大肠杆菌中表达的融合蛋白 ,利用ProScission蛋白酶 ,将线粒体小分子热激蛋白从融合蛋白中切出 ,获得纯化的线粒体小分子热激蛋白。分析线粒体小分子热激蛋白对柠檬酸合成酶体外热稳定性的影响 ,发现线粒体小分子热激蛋白可以减缓柠檬酸合成酶的热变性 ,并促进热变性的柠檬酸合成酶复性 ,说明高温下线粒体小分子热激蛋白对柠檬酸合成酶有保护功效。利用转基因方法 ,将线粒体小分子热激蛋白基因导入烟草 ,在CaMV35S启动子的驱动下 ,导入烟草的线粒体小分子热激蛋白基因可在烟草细胞中组成性地表达 ,比较正常烟草线粒体和转基因烟草线粒体的氧化磷酸化效率 ,发现高温下转基因烟草线粒体的氧化磷酸化效率高于对照 ,说明线粒体小分子热激蛋白对线粒体具有保护作用。此外 ,转基因烟草花粉粒的高温萌发率也高于对照 ,说明线粒体小分子热激蛋白不但可以增加线粒体的耐热性 ,而且可以提高细胞的抗热能力