金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达

编号 zgly0001334662

文献类型 期刊论文

文献题名 金黄色葡萄球菌粘附素Fnbp A功能区基因的克隆和原核表达

作者 杨宏军  高运东  王长法  杨少华  仲跻峰  赵宏坤 

作者单位 山东省农业科学院奶牛研究中心  山东省农业科学院奶牛研究中心 山东济南250000  山东农业大学动物科技学院  山东泰安271018  山东济南250000 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2008年01期

年份 2008 

分类号 S852.61 

关键词 金黄色葡萄球菌  乳腺炎  粘附素  纤连蛋白连接蛋白A 

文摘内容 【目的】克隆和表达奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤连蛋白连接蛋白A(Fnbp A)的功能基因。【方法】采集奶牛急性乳腺炎乳样,分离金黄色葡萄球菌,提取其DNA作为模板,利用设计合成的特异性引物,对金黄色葡萄球菌进行FnbpA功能基因的PCR扩增。回收目的基因并连接到T载体,鉴定后进行测序,然后将FnbpA基因连接到pET-32a(+)质粒中,经鉴定后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,IPTG诱导后采用SDS-PAGE分析蛋白质的表达情况。【结果】PCR产物经电泳成像,仅金黄色葡萄球菌在1.7 kb处出现特异性条带,测序发现其与GenBank公布的FnbpA序列的同源性为98%;蛋白诱导表达SDS-PAGE分析发现,在80 ku处出现特异性条带。【结论】试验成功地克隆到FnbpA基因,并在大肠杆菌中获得高效表达,蛋白量为33.4%,为进一步研究金黄色葡萄球菌粘附素基因工程疫苗奠定了基础。