H9亚型禽流感病毒血凝素基因重组禽痘病毒的构建

编号 zgly0001349354

文献类型 期刊论文

文献题名 H9亚型禽流感病毒血凝素基因重组禽痘病毒的构建

作者 陈红英  黄青云  崔保安  李新生  赵丽  管倩 

作者单位 河南农业大学牧医工程学院  华南农业大学兽医学院  郑州牧业高等专科学校动物医学系 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2008年12期

年份 2008 

分类号 S852.5 

关键词 H9亚型禽流感病毒  HA基因  重组禽痘病毒  基因工程疫苗 

文摘内容 【目的】获得表达H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的重组禽痘病毒。【方法】将含禽痘病毒启动子LP2EP2驱动的HA基因,插入到禽痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681/HA。用脂质体将其转染已感染亲本禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与禽痘病毒基因组发生同源重组,产生表达HA的重组禽痘病毒rFPV-HA。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选后,对重组病毒进行多次蚀斑克隆,并用间接免疫荧光法对感染重组病毒鸡胚成纤维细胞中HA的表达产物进行鉴定。【结果】以重组禽痘病毒DNA为模板,利用HA基因特异引物进行PCR,扩增出1条约1.7 kb左右的带。以间接免疫荧光法证实重组禽痘病毒能表达HA。【结论】成功构建了表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组禽痘病毒,且构建的重组禽痘病毒能表达具有生物学活性的HA。