伪狂犬病病毒gB基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

编号 zgly0001487676

文献类型 期刊论文

文献题名 伪狂犬病病毒gB基因的原核表达及间接ELISA方法的建立

作者 王雨  吉艺宽  程艺  张宝石  向柯宇  琚春梅 

作者单位 华南农业大学兽医学院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S852.655 

关键词 伪狂犬病病毒  gB基因  主要抗原表位区  gB768-ELISA 

文摘内容 为了建立评价伪狂犬病疫苗免疫效果的方法,应用PCR方法扩增gB基因的主要抗原表位区序列,大小为768bp,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切后克隆至pET-32a(+)载体,构建重组表达质粒pETgB768,转化大肠埃希菌BL21(DE3)后,通过IPTG进行诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot检测融合蛋白的表达情况及其反应原性。用纯化的gB768蛋白作为包被抗原建立间接gB768-ELISA检测方法,试验结果表明,该方法具有良好的敏感性、特异性、重复性。用该方法检测128份临床送检猪血清样本,并与商品化ELISA试剂盒检测结果进行比较,符合率为93.8%。该方法的建立为猪伪狂犬病疫苗免疫效果的评估奠定了基础。