编号 zgly0001655370
文献类型 期刊论文
文献题名 组蛋白H3Thr3磷酸化在Sf9细胞有丝分裂中的动态定位
作者单位 南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室昆虫生物反应器河南省工程实验室中英南阳洛桑昆虫生物学联合实验室
母体文献 昆虫学报
年卷期 2018年11期
年份 2018
分类号 Q253
关键词 Sf9细胞 组蛋白H3 磷酸化 有丝分裂 免疫荧光 胞质分裂
文摘内容 【目的】研究组蛋白H3Thr3磷酸化这一表观标记在Sf9细胞有丝分裂中的功能。【方法】通过固相法合成一段包含组蛋白H3第1-9位氨基酸的肽段[ARTKQTARKC],将第3位苏氨酸进行磷酸化修饰(P-Pep 226555)或者不修饰(NP-Pep 080472)后制备抗体,Western blot检测抗体的特异性。培养Sf9细胞,通过爬片制备细胞处于有丝分裂不同时期的玻片,以免疫荧光标记检测磷酸化H3Thr3(H3Thr3ph)抗体在Sf9细胞有丝分裂不同时期的定位特点。【结果】在Sf9细胞中,组蛋白H3Thr3的磷酸化发生在前期细胞染色体的特定位置;随着细胞周期的进行,磷酸化信号逐渐增强,中期达到最高水平,有丝分裂后期在形成子细胞的赤道板处均匀分布,末期仅在赤道板特定位置残留微弱的磷酸化信号。【结论】H3Thr3的磷酸化与Sf9细胞胞质有丝分裂相关。