樟树不同组织总RNA提取方法比较及RT-PCR检测

编号 zgly0000815333

文献类型 期刊论文

文献题名 樟树不同组织总RNA提取方法比较及RT-PCR检测

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 伍艳芳  徐海宁  宋晓琛  江香梅 

作者单位 国家林业局 

母体文献 江西林业科技 

年卷期 2013(5)

页码 1-4

年份 2013 

分类号 S794.4 Q78 

关键词 樟树  不同组织  总RNA  提取方法  RT-PCR检测 

文摘内容 采用Invitrogen Total RNA Purification Kit直接提取法,Trizol试剂盒法和本实验室改良的CTAB法,分别提取樟树不同组织(根、茎、叶和花)的总RNA,并对提取效果进行了检测和比较分析。结果表明: (1)采用本实验室改良的CTAB法提取的RNA完整性好,无杂质污染且得率高,稳定性好,可满足半定量RT-PCR等试验需要;而Invitrogen Total RNA Purification Kit直接提取法和Trizol试剂盒法提取的樟树不同组织总RNA,结果均不理想,存在RNA 28S rRNA谱带模糊不清、有DNA污染、降解严重和得率低等问题,这两种方法均不适用于樟树不同组织RNA的提取。(2)樟树不同组织总RNA提取的得率不同,其中叶片的总RNA得率最高,达到782.34 mg/kg;茎的得率最低,为514.33 mg/kg。(3)以Actin作为内参基因,对樟树根、茎、叶和花中的Fad2基因片段进行半定量RT-PCR检测,结果表明,Fad2基因片段在樟树叶片中的表达量相对较高,而在花中的表达量较低。