花椒原生质体分离与培养研究

编号 zgly0001649889

文献类型 期刊论文

文献题名 花椒原生质体分离与培养研究

作者 李南  杨秀平  周正君  邓鹏 

作者单位 西北农林科技大学林学院 

母体文献 西北林学院学报 

年卷期 2018年06期

年份 2018 

分类号 S573.9 

关键词 花椒  原生质体分离  原生质体培养 

文摘内容 以花椒试管苗叶片、愈伤组织和悬浮细胞为试验材料,通过单因素试验研究酶液浓度、渗透压调节剂浓度对花椒原生质体分离的影响,并以花椒试管苗叶片分离出的原生质体为试验材料,研究培养基种类、培养密度、不同激素配比对花椒原生质体培养的影响。结果表明,酶液浓度、渗透压调节剂浓度对花椒原生质体分离有显著影响。在适宜条件下,用甘露醇作花椒原生质体分离的渗透压调节剂,浓度在0.6～0.7mol·L-1时分离效果最佳。以花椒叶片为原生质体分离材料的最佳酶液组成为CPW-0.7mol·L-1甘露醇+1.0%（w/v）纤维素酶R-10+1.5%（w/v）果胶酶,酶解时间为10h,纯化后的原生质体产量和活力分别可达82.36×105个·g-1和72.74%。以愈伤组织和悬浮细胞为分离材料的最佳酶液组成均为CPW-0.6mol·L-1甘露醇+2.0%（w/v）纤维素酶R-10+0.5%（w/v）果胶酶,酶解12～14h,纯化后的原生质体产量及活力分别为31.26×105个·g-1、59.15%和53.87×105个·g-1、63.92%。以花椒试管苗叶片为原生质体分离材料,分离纯化后的花椒原生质体在无激素的WPM培养基中,培养密度为1×105个·mL-1,培养第3天原生质体第1次分裂,2周分裂3～5次,原生质体28d后形成微细胞团,培养60d后可形成2mm左右的愈伤组织。