黑腹果蝇保幼激素反应区(JHRR)与核蛋白结合能力调控的分子机制

编号 zgly0001528266

文献类型 期刊论文

文献题名 黑腹果蝇保幼激素反应区(JHRR)与核蛋白结合能力调控的分子机制

作者 何倩毓  张原熙 

作者单位 黑龙江八一农垦大学动物科技学院  大庆市环保局环境监测中心站 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2016年12期

年份 2016 

分类号 Q966 

关键词 黑腹果蝇  保幼激素  Met  JHRR  Hsp83  核蛋白结合 

文摘内容 【目的】保幼激素反应区（juvenile hormone response region,JHRR）是在黑腹果蝇Drosophila melanogaster Krüppel homolog 1（Kr-h1）启动子转录调控区中鉴定获得的长120 bp的核苷酸序列。本研究旨在检测果蝇JHRR中3个类E-box序列（2个B box和1个C box）对JHRR核蛋白结合能力的影响,以及保幼激素（juvenile hormone,JH）、JH受体Met（Methoprene-tolerant）和热激蛋白Hsp83对JHRR核蛋白结合能力的调控。【方法】利用凝胶迁移阻滞（electrophoretic mobility shift assay,EMSA）技术分析果蝇JHRR中2个B box或1个C box突变后JHRR与Kc细胞中核蛋白的结合情况;提取游走早期JH滴度较高时期JH缺失果蝇（Aug21-GAL4>UAS-Grim）、Met/Gce双缺失果蝇(Met27gce2.5k)、Met超表达果蝇（Lsp2-GAL4>UAS-Met-V5）以及Hsp83纯合突变果蝇（Hsp8308445）脂肪体组织中的核蛋白,利用EMSA技术分析它们对JHRR核蛋白结合能力的调控情况。【结果】EMSA检测结果表明,B box或C box突变后均可降低JH促进的JHRR与Kc细胞中核蛋白的结合,且C box的效果更强;JH缺失果蝇、Met/Gce双缺失果蝇脂肪体组织中核蛋白与JHRR的结合几乎检测不到,而在Hsp83纯合突变果蝇脂肪体组织中核蛋白与JHRR的结合显著下降。相反,JHRR与核蛋白的结合在Met超表达果蝇中显著增强。【结论】B box和C box对JHRR与核蛋白结合是必需的,且JHRR与核蛋白的结合依赖于JH和Met,并且受Hsp83的调控。