RNAi法分析香菇邻氨基苯甲酸合酶基因功能

编号 zgly0001634788

文献类型 期刊论文

文献题名 RNAi法分析香菇邻氨基苯甲酸合酶基因功能

作者 马超君  王刚正  周莎莎  罗义  龚钰华  边银丙 

作者单位 华中农业大学植物科学技术学院应用真菌研究所 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2018年05期

年份 2018 

分类号 S646.12 

关键词 香菇  高温胁迫  耐热性  邻氨基苯甲酸合酶  转化子 

文摘内容 邻氨基苯甲酸合酶(Trp E)是生物体内一种重要的逆境诱导蛋白,其在逆境条件下的响应保证了生物体生存相关产物的正常代谢。本文以香菇Lentinula edodes栽培菌株S606为试验材料,以Le Trp E功能结构保守区域395bp的反向互补片段为干扰片段,构建Letrp E基因双向启动子RNAi载体;采用根癌农杆菌介导转化法侵染香菇菌丝,通过PCR方法检测DNA插入片段,获得11个阳性转化子;实时荧光定量PCR分析结果表明,2个转化子Letrp E基因表达量较野生型菌株下调了2–3倍,确认其为Letrp E基因RNAi转化子;菌丝体在40℃高温处理24h后,检查到吲哚-3-乙酸合成途径中基因Le Tam-1在野生菌株S606表达量上调,而在2个RNAi转化子中表达量下调;RNAi转化子菌丝体在25℃下不能恢复生长,而野生型菌丝体可以恢复生长。研究表明,香菇Letrp E基因的功能与耐热性有关。