一种快速高效的油茶叶片DNA提取方法

编号 zgly0001639827

文献类型 期刊论文

文献题名 一种快速高效的油茶叶片DNA提取方法

作者 黄国文  管天球  赵雨云  陈莫林  刘宏辉 

作者单位 湖南科技学院化学与生物工程学院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2018年13期

年份 2018 

分类号 S794.4 

关键词 油茶  叶片  DNA提取  改良CTAB法 

文摘内容 油茶叶片含有较多的多糖和多酚等次生代谢产物是提取DNA的重要障碍。本研究以油茶叶片为材料研究高质量的DNA提取方法。建立了一种改良的CTAB法,运用2×CTAB缓冲液来裂解细胞,在裂解细胞后的溶液中加入终浓度为2 mol/L Li Cl,用氯仿异戊醇抽提溶液,用等体积的异丙醇沉淀DNA,用预热的70%乙醇洗涤DNA沉淀。运用紫外分析和琼脂糖凝胶电泳分析测定了DNA的产率和质量,并与经典SDS法、经典CTAB法、高盐低p H法进行了对比。结果表明,改良的CTAB法提取的DNA产率比经典SDS的少,与经典CTAB法和高盐低pH法的相似,达到39.0μg/g,且纯度高,无RNA的污染。改良的CTAB法提取的叶片DNA可用于油茶后续的PCR分析研究。