编号 zgly0000578621
文献类型 期刊论文
文献题名 拟南芥细胞异三聚体G蛋白的分离纯化
作者单位 扬州大学生物科学与技术学院
母体文献 广西植物
年卷期 2008,28(2)
页码 269-272,147
年份 2008
分类号 Q946.1
关键词 拟南芥 异三聚体G蛋白 亚基 纯化
文摘内容 以拟南芥哥伦比亚Columbia(Col—O)野生型悬浮培养细胞为材料,采用超声波破碎、匀浆、离心、40%~60%饱和度硫酸铵分步沉淀、Sephadex G-25脱盐、DEAE—Sepharose Fast Flow离子交换、Sephadex G-200凝胶过滤,最后经过Sepharose CL-6B得到纯化的目的蛋白,蛋白收率为0.097%。纯化的蛋白质经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定显示为一条带,经Western blotting证实为G蛋白。把经Native—PAGE鉴定的蛋白质的条带回收,进行SDS—PAGE显示有3条带。一条是Gα亚基,其分子量为60kDa左右;另外2条带分子量为45kDa和35kDa,可能是β、γ亚基,初步证实拟南芥中存在异三聚体G蛋白。G蛋白提取方法的建立为在基因突变型拟南芥中G蛋白功能的研究奠定基础。