RT－PCR联合一步法扩增G蛋白α亚基基因的开放阅读框

编号 zgly0001172294

文献类型 期刊论文

文献题名 RT－PCR联合一步法扩增G蛋白α亚基基因的开放阅读框

作者 彭艳华  黄永秀  齐义鹏 

作者单位 武汉大学病毒系分子病毒室  中国科学院武汉植物研究所 

母体文献 武汉植物学研究 

年卷期 1996年02期

年份 1996 

分类号 Q503 

关键词 逆转录－多聚酶链式反应  信使核糖核酸  开放阅读框  G蛋白α亚基基因  拟南芥菜 

文摘内容 报道逆转录－多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）联合一步程序，扩增大于１ｋｂ的拟南芥菜Ｇ蛋白α亚基基因的开放阅读框。该程序中，当ＲＮＡ模板和引物变性，并在同一管中加入ＰＣＲ缓冲液、４种ｄＮＴＰ底物、逆转录酶和ＴａｑＤＮＡ聚合酶之后，就不需其它手工操作步骤，因而可同时进行大批量样品的操作。实验结果证明ＡＭＶ（鸟类骨髓性白血病病毒）逆转录酶对ＴａｑＤＮＡ聚合酶的活性没有抑制作用。这种ＲＴ－ＰＣＲ联合一步法可从０．５μｇ的总ＲＮＡ中快速地扩增长于１．０ｋｂ的ｃＤＮＡ片段。