二乔刺槐愈伤组织超低温保存及适宜降温方法

编号 zgly0000639132

文献类型 期刊论文

文献题名 二乔刺槐愈伤组织超低温保存及适宜降温方法

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 翟晓巧  程斐  朱延林 

作者单位 河南农业大学  河南省林业科学研究院 

母体文献 林业科学 

年卷期 2009,45(10)

页码 49-54

年份 2009 

分类号 S722.37 

关键词 二乔刺槐  愈伤组织  超低温保存  降温方法 

文摘内容 二乔刺槐叶片在添加5mg·mL-16-BA的MS培养基上诱导出愈伤组织。将愈伤组织在冻存液（MS＋10%DMSO＋0.5mol·L-1蔗糖）中于4℃预冷2h,置入程序降温仪以1℃.min-1的速率降温至-7℃停留1h,再以0.1℃.min-1的冷却速率将样品冷却至-20℃,平衡1h,接下来以0.3℃.min-1的冷却速率将样品冷却至-40℃投入液氮保存,是适宜的降温方法。液氮保存1天后以38℃温水浴解冻。解冻后将愈伤组织用液体培养基（MS＋6-BA5mg·mL-1＋30g.L-1蔗糖）洗涤后转入恢复培养基暗培养,14天后放于光照下培养。光培养3天后冻后愈伤组织上开始长出新生愈伤组织颗粒,成活率最高可达52%,新生愈伤组织可诱导成苗。