大肠杆菌高效感受态细胞的制备及快捷转化体系的建立

编号 zgly0000708644

文献类型 期刊论文

文献题名 大肠杆菌高效感受态细胞的制备及快捷转化体系的建立

作者 杨坤  巩振辉  李大伟 

作者单位 西北农林科技大学园艺学院 

母体文献 北方园艺 

年卷期 2010(14)

页码 127-130

年份 2010 

分类号 Q943.2 

关键词 高效法  感受态细胞制备  质粒DNA  转化效率 

文摘内容 比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率,并优化了质粒DNA转化感受态细胞体系。结果表明: 高效法制备的感受态细胞转化效率极显著高于普通法制备感受态细胞的转化效率,其效率提高了966.1%,而高效法感受态细胞转化效率与商品化的感受态细胞转化效率差异不显著。-80℃超低温长期保存时,相比较于15%甘油,以7%DMSO为冻存保护剂保存的感受态细胞其转化效率达到1.1×107,较15%甘油冻存保护剂保存的转化效率提高了69%。温浴5 min,冰浴10 min时,其转化效率最高,达到4.95×107。应用高效法制备的感受态细胞转化不同大小质粒的效率极显著高于普通大肠杆菌感受态细胞,其转化效率较普通大肠杆菌感受态细胞的提高了550%,而转化时间缩短至普通大肠杆菌感受态细胞的12.5%,仅为15min。