冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)的快速分子检测

编号 zgly0000569287

文献类型 期刊论文

文献题名 冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)的快速分子检测

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 张海峰  任众  刘翔  张正光  王源超  吴新华  郑小波 

作者单位 南京农业大学植物保护学院农业部病虫害监测与治理重点开放实验室  江苏省连云港出入境检验检疫局  江苏省出入境检验检疫局 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2008,38(3)

页码 231-237

年份 2008 

分类号 S41-30  S432.44 

关键词 冬生疫霉  分子检测  PCR 

文摘内容 由冬生疫霉(Phytophthora hibernalis)引起的疫病是一类植物检疫性病害。为建立该病原菌的快速检测技术，本文比较分析了冬生疫霉和其它疫霉的ITS序列，在此基础上设计了一对检测冬生疫霉的特异性引物751F／752R，该对引物从冬生疫霉中扩增得到一条616bp的条带，而其它19种疫霉和其它真菌菌株均无扩增条带，表明该对引物对冬生疫霉具有特异性。在25μL PCR反应体系中，引物751F／752R检测灵敏度为10龟基因组DNA；而以卵菌ITS区通用引物ITS1／ITS4和751F／752R进行套式PCR扩增，能够检测到10ag的基因组DNA，使检测灵敏度提高了1000倍。该检测体系对灭菌水中游动孢子的检测灵敏度可达0．5个游动孢子。结合快速碱裂解法提取发病组织的DNA，采用该PCR检测技术，在1个工作日内即可从人工接种发病的植物组织中特异性的检测到该病原菌。表明本研究建立的检测方法可用于冬生疫霉的快速分子检测。