薇甘菊几丁质酶基因的原核表达及活性分析

编号 zgly0000649230

文献类型 期刊论文

文献题名 薇甘菊几丁质酶基因的原核表达及活性分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 李冬梅  彭少麟 

作者单位 广东省农业科学院花卉研究所  中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室 

母体文献 西北植物学报 

年卷期 2010(5)

页码 894-900

年份 2010 

分类号 Q786 

关键词 薇甘菊  几丁质酶基因  融合蛋白  原核表达 

文摘内容 将薇甘菊Mmchi1基因cDNA序列的编码区插入到原核表达载体pET-32a(+)中,构建融合表达质粒,并在大肠杆菌中进行了融合蛋白6×His-Mmchi1的诱导表达、Western blot和酶活性分析.结果表明,0.1 mmol/LIPTG、25℃诱导4 h,在大肠杆菌Rosetta-gami(DE3)中能获得可溶性的6×His-Mmchi1;Western blot证实表达的6×His-Mmchi1能与抗6×His的单抗发生特异性反应,分子量约为55 kD,与预测的融合蛋白分子量相符;纯化后的6×His-Mmchi1最佳酶活性pH和温度分别为5.5~6.5和35~40℃.为进一步研究融合蛋白6×His-Mmchi1的功能奠定了基础.