桑树原生质体分离条件的优化试验

编号 zgly0000778697

文献类型 期刊论文

文献题名 桑树原生质体分离条件的优化试验

学科分类 220.1070;森林植物学

作者 羿德磊  王海朋  崔为正  袁传忠  王洪利 

作者单位 山东农业大学林学院 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2012,38(2)

页码 204-209

年份 2012 

分类号 S888.2 

关键词 桑树  原生质体  分离材料  酶液组合  渗透压调节剂  酶解温度  酶解时间 

文摘内容 为了分离获取高产量、高活力的桑树原生质体,分别以桑树的组培苗细切叶片、胚性悬浮培养细胞、粗切愈伤组织和细切愈伤组织等为材料,采用正交试验和单因素试验的方法对桑树原生质体酶解分离条件中的分离酶液组合、渗透压调节剂、酶解温度、酶解时间等因素进行优化。最佳分离酶液组合为100 U/mL纤维素酶R-10+150 U/mL果胶酶Y-23+6 U/mL离析酶R-10+细胞-原生质体洗液(1 480 mg/L CaCl2.2H2O,27.2 mg/L KH2PO4),以0.6 mol/L甘露醇为渗透压调节剂,在28℃酶解温度条件下酶解6 h,用桑树胚性悬浮培养细胞作分离材料可获得7.8×106个/g的原生质体产量,且原生质体活力达91.4%。研究结果显示,选择合适的分离材料以及酶解分离条件是高效获取高活力桑树原生质体的关键。