慢病毒活体介导精原干细胞生产转基因小鼠

编号 zgly0000831483

文献类型 期刊论文

文献题名 慢病毒活体介导精原干细胞生产转基因小鼠

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 辛颖  张涛  张优优  张智英 

作者单位 西北农林科技大学动物科技学院  陕西理工学院生物科学与工程学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2014(6)

页码 15-20

年份 2014 

分类号 Q785 

关键词 慢病毒  活体  精原干细胞  转基因小鼠 

文摘内容 【目的】:用慢病毒在体内感染精原干细胞, 建立转基因动物生产技术平台。【方法】:用三质粒慢病毒载体系统转染293T细胞包装慢病毒, 转染后裂解细胞, 收集携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒。将慢病毒液注射到小鼠曲细精管, 获得F0代小鼠, 制备小鼠睾丸组织切片, 进行免疫双荧光检测。将F0代小鼠与野生型母鼠交配, 获得F1代小鼠, PCR检测F1代是否为转基因小鼠。【结果】:通过裂解细胞的方法成功制得慢病毒, 将其注射到小鼠曲细精管, 获得了10只F0代小鼠, 经免疫双荧光检测, 发现慢病毒可在活体上感染精原干细胞。8只F0代小鼠与野生型母鼠交配后共获得了41只F1代小鼠, 经PCR检测, 21只携带慢病毒基因片段, 转基成功率为51.22%, 表明慢病毒介导的基因改造是可遗传的。【结论】:建立了一种操作简单、花费少、易于实施的慢病毒活体介导精原干细胞生产转基因小鼠的技术体系, 该技术也可以推广到其他动物上, 对于加速功能基因鉴定、疾病模型构建和家畜转基因育种等领域的研究有促进作用。