山葡萄VaCBF1转录因子基因的克隆与表达分析

编号 zgly0000823647

文献类型 期刊论文

文献题名 山葡萄VaCBF1转录因子基因的克隆与表达分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 王法微  刘洋  吴学彦  李晓薇  李海燕 

作者单位 吉林农业大学生命科学学院生物反应器与药物开发重点实验室  吉林农业大学生命科学学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2013(12)

页码 86-92

年份 2013 

分类号 S663.1 

关键词 山葡萄  CBF转录因子  基因克隆与表达 

文摘内容 【目的】:克隆山葡萄(Vitis amurensis )CBF1转录因子基因(VaCBF1), 为其功能的深入研究及其在植物抗寒基因工程中的应用奠定基础。【方法】:根据植物CBF基因AP2/EREBP保守区设计1对简并引物, 利用PCR法从山葡萄cDNA中扩增VaCBF1基因的中间片段。再根据中间片段区域设计2对特异引物, 采用反向PCR法扩增VaCBF1基因的5′端和3′端序列。将中间片段与5′端和3′端序列拼接后得到山葡萄VaCBF1基因的cDNA全长序列, 据此设计1对特异引物, PCR扩增VaCBF1基因编码区的全长序列, 并对其进行生物信息学分析。同时, 利用荧光定量PCR分析山葡萄VaCBF1基因在不同逆境胁迫(干旱、低温、盐胁迫)下的表达情况。【结果】:成功地从山葡萄中克隆得到VaCBF1基因cDNA全长序列, 其长度为762 bp, 编码253个氨基酸, 在GenBank注册号为DQ517296。同源性分析证实, VaCBF1属于CBF转录因子家族。荧光定量PCR分析发现, 低温胁迫可以诱导山葡萄VaCBF1基因高表达, 而该基因的表达不受盐及干旱处理诱导。【结论】:首次从山葡萄中克隆了VaCBF1基因, 并证实该基因参与了植物对低温胁迫的应答。