基于适体技术的桔青毒素检测方法的建立

编号 zgly0001530649

文献类型 期刊论文

文献题名 基于适体技术的桔青毒素检测方法的建立

作者 张亚军  金庆日  邵春艳  桂海娈  方维焕  杨梦华  宋厚辉 

作者单位 浙江农林大学动物科技学院  浙江大学动物科学学院 

母体文献 菌物学报 

年卷期 2016年02期

年份 2016 

分类号 TS207.5  S859.8 

关键词 桔青毒素  指数富集适体系统进化技术  适体  亲和度 

文摘内容 桔青毒素(citrinin,CTN)是以玉米、谷物、奶酪等为主要成分的食品和动物饲料中常见的、由桔青霉菌产生的酮类真菌毒素,可引起人和动物的慢性中毒或癌症,一直缺少灵敏的快速检测方法。本文通过指数富集适体系统进化技术(简称SELEX)对可能与CTN结合的特异性适体进行了筛选,经过15轮循环,得到17条适体。通过二级结构分析、亲和力检测发现适体13(Apt-13)对CTN有较好的亲和度,解离常数Kd为0.06μmol/L。进一步利用非荧光标记染料Pico Green,利用其与双链DNA结合的原理,建立了桔青毒素非标记荧光检测方法,30min完成检测,最低检测限达到国家标准(50ppb)且与其他毒素无交叉反应。本研究建立的基于适体的桔青毒素检测技术成本低,可以替代传统的基于抗体的检测方法,为霉菌毒素的精准检测技术的开发提供了实验证据。