白桦开花抑制因子BpFLC与BpSVP蛋白同源互作域筛选与分析

编号 zgly0001497378

文献类型 期刊论文

文献题名 白桦开花抑制因子BpFLC与BpSVP蛋白同源互作域筛选与分析

作者 郑唐春  臧丽娜  代丽娟  杨传平  曲冠证 

作者单位 东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室 

母体文献 植物生理学报 

年卷期 2015年09期

年份 2015 

分类号 S792.153 

关键词 白桦  BpFLC  BpSVP  酵母双杂交  截短体  蛋白互作 

文摘内容 开花是植物由营养生长向生殖生长的转换点,该过程受内源基因与环境信号共同调控。FLC(Flowering locus C)和SVP(Short vegetative phase)是开花途径中关键的抑制开花因子。本文利用酵母双杂交技术深入研究白桦开花抑制因子FLC与SVP的自身聚合作用的分子机理。从重组质粒p GBKT7-BpFLC、p GBKT7-Bp SVP分别克隆出6个BpFLC截短体[BpFLC1(aa1~73)、BpFLC2(aa1~173)、BpFLC3(aa74~173)、BpFLC4(aa60~208)、BpFLC5(aa74~208)和BpFLC6(aa174~208)]和6个BpSVP截短体[BpSVP1(aa1~68)、Bp SVP2(aa1~172)、Bp SVP3(aa69~172)、BpSVP4(aa60~225)、BpSVP5(aa69~225)和Bp SVP6(aa173~225)],分别编码MADS型蛋白的MI、MIK、K、IKC、KC和C域。在酵母Y2HGold菌中,分别共转质粒pGBKT7-BpFLC1~6×pGADT7-BpFLC及p GBKT7-BpSVP×pGADT7-BpSVP1~6。酵母转化子Y2HGold[p GBKT7-BpFLC×p GADT7-BpFLC]、Y2HGold[pGBKT7-BpFLC2~5×pGADT7-BpFLC],可在选择性固体培养基TDO(SD/-Leu/-Trp/-His)、QTO/A(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/Ab A)上生长,并在QDO/A/X(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade/AbA/X-α-gal)上长出蓝色菌落,表明BpFLC能与自身及截短体蛋白BpFLC2~5同源结合。此外酵母Y2HGold[pGBKT7-BpSVP×pGADT7-Bp SVP]、Y2HGold[pGBKT7-Bp SVP×p GADT7-BpSVP2~5]也能同时激活报告基因AUR1-C、HIS3、ADE2、MEL1,说明BpSVP能与自身及截短体蛋白BpSVP2~5同源结合。对保守区的序列结构进一步分析发现:BpFLC与BpSVP的K域是它们能够同源结合,介导BpFLC与BpSVP自身形成同源二聚体的关键。