百合总蛋白质提取及双向电泳技术体系优化

编号 zgly0001529042

文献类型 期刊论文

文献题名 百合总蛋白质提取及双向电泳技术体系优化

作者 张艺萍  王继华  瞿素萍  杨秀梅  马璐琳  许凤  何月秋 

作者单位 云南农业大学  云南省农业科学院花卉研究所国家观赏园艺工程研究中心云南省花卉育种重点实验室云南省花卉工程技术研究中心 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2016年10期

年份 2016 

分类号 S682.29 

关键词 百合  总蛋白提取  双向电泳 

文摘内容 本研究以百合组培苗叶片为试验材料,研究不同蛋白提取方法的得率、电泳上样量及聚焦除盐时间对双向电泳图谱的影响。结果表明:采用三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法提取百合叶片蛋白质比Tris-HCl法效果好,蛋白得率为38.5 mg/g,且颜色较白,获得的2-DE图谱较好;上样量为600μg时得到的图谱分辨率高、蛋白斑点分布均匀、清晰;等电聚焦(Iso-electrofocusing,IEF)中的2个除盐步骤的时间分别为2 h和2.5 h时,可以较好地去除盐分,顺利完成聚焦并得到较好的双向电泳图谱。该体系的建立将为下一步百合蛋白质组学研究及利用分子育种技术培育抗病品种提供技术资料。