编号
zgly0001305586
文献类型
期刊论文
文献题名
DNA未知片段APCR克隆的优化
作者单位
河南省农业科学院生物技术研究所
郑州大学生物工程系
河南省农业科学院生物技术研究所 郑州450002
郑州450052
郑州450002
母体文献
植物生理学通讯
年卷期
2005年04期
年份
2005
分类号
Q785
关键词
APCR
DNA未知片段
小麦
启动子序列
文摘内容
用锚定PCR(APCR)技术对未知的小麦淀粉合成关键酶基因gbssI和sbeIIa启动子序列进行扩增。通过对APCR反应进行优化,获得了gbssI启动子序列(4.1kb)和sbeIIa启动子序列(3.1kb)。结果表明:减少模板加入量(由1μL降低至1/100μL)和增大反应体积(由50μL增到100μL)均可在一定程度上减少非特异的结果出现;升高变性温度(由94℃提高到98℃)和延伸温度(由55℃提高到72℃)并延长延伸时间则能有效地消除APCR中的非特异性条带。