DNA未知片段APCR克隆的优化

编号 zgly0001305586

文献类型 期刊论文

文献题名 DNA未知片段APCR克隆的优化

作者 苗红梅  岳彩鹏  赵永英 

作者单位 河南省农业科学院生物技术研究所  郑州大学生物工程系  河南省农业科学院生物技术研究所 郑州450002  郑州450052  郑州450002 

母体文献 植物生理学通讯 

年卷期 2005年04期

年份 2005 

分类号 Q785 

关键词 APCR  DNA未知片段  小麦  启动子序列 

文摘内容 用锚定PCR(APCR)技术对未知的小麦淀粉合成关键酶基因gbssI和sbeIIa启动子序列进行扩增。通过对APCR反应进行优化,获得了gbssI启动子序列(4.1kb)和sbeIIa启动子序列(3.1kb)。结果表明:减少模板加入量(由1μL降低至1/100μL)和增大反应体积(由50μL增到100μL)均可在一定程度上减少非特异的结果出现;升高变性温度(由94℃提高到98℃)和延伸温度(由55℃提高到72℃)并延长延伸时间则能有效地消除APCR中的非特异性条带。